8-ohdg檢測試劑盒利用免疫酶技術可以在較短時間內,完成成千上萬份樣品的檢測工作,真正的讓實驗者受益,節省實驗成本和實驗時間。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關。 通常,酶聯免疫反應曲線是規則的,如果曲線不規則說明實驗穩定性差,宜做平行樣修正。
8-ohdg檢測試劑盒采用競爭ELISA等實驗方法。用待測物質抗原包被于酶標板上,實驗時樣品或標準品中的待測物質與包被的待測物質競爭標記的抗待測物質單抗上的結合位點,游離的成分被洗去。加入辣根過氧化物酶標記的親和素,與親和素特異性結合而形成免疫復合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB),TMB在辣根過氧化物酶的催化下現藍色,加終止液后變為黃色。用酶標儀在450nm波長處測OD值,待測物質濃度與OD450值之間呈反比,通過繪制標準曲線計算出樣品中待測物質的濃度。
8-ohdg檢測試劑盒操作步驟復雜,影響反應因素較多,特別是固相載體的包被難達到各個體之間,因此在定量測定中,每批測試均須用一系列不同濃度的參考標準品在相同的條件下制作標準曲線。測定大分子量物質的夾心法ELISA,標準曲線的范圍一般較寬,曲線zui高點的吸光度可接近2.0,繪制時常用半對數紙,以檢測物的濃度為橫坐標,以吸光度為縱坐標,將各濃度的值逐點連接,所得曲線一般呈S形,其頭、尾部曲線趨于平坦,較呈直線的部分是的檢測區域。
